O procedimento para determinar grupos sanguíneos de acordo com o sistema ABOé identificar antígenos A e B em eritrócitos usando anticorpos padrão e o uso de aglutininas no plasma ou soro do sangue sendo analisadas por glóbulos vermelhos padrão. A técnica foi desenvolvida no início do século 20 e ainda é usada ativamente na medicina. A determinação dos antigénios A e B é devida a zeólitos anti-A e anti-B.

Conceitos básicos

Os doadores são sempre determinados não apenas por antígenosem eritrócitos, mas também aglutininas em soro (plasma) usando eritrócitos padrão. O sangue venoso é usado como biomaterial. Antes do teste, você deve desistir de alimentos gordurosos um dia antes do teste e não fumar durante meia hora antes de fazer o teste. Os grupos sanguíneos são determinados duas vezes: primeiro no departamento de tratamento, onde o material é colhido, e depois confirmado por um estudo no laboratório.

determinação do grupo sanguíneo em um caminho cruzado

A definição de grupos sanguíneos de acordo com o sistema ABO éo principal teste utilizado na transfusiologia. Além disso, um sistema similar de grupos sanguíneos está presente em alguns animais, por exemplo em chimpanzés, gorilas e bonobos.

História da descoberta

Na ciência, há uma visão geralmente aceita queO método de determinar grupos sanguíneos de acordo com o sistema ABO foi revelado pela primeira vez por Karl Landsteiner, cientista austríaco, em 1900. Então ele descreveu em seu trabalho três tipos de antígenos. Para isso, em trinta anos, recebeu o Prêmio Nobel de Medicina e Fisiologia. Devido ao fato de que não havia uma relação estreita entre os cientistas, eles descobriram que o serologista checo Jan Janski, independentemente das pesquisas de K. Landsteiner, descreveu pela primeira vez quatro grupos de sangue humano, mas seus estudos não eram conhecidos por uma ampla audiência. Atualmente, é a classificação desenvolvida por J. Jansky que é aplicada na Rússia e nas repúblicas da ex-URSS. Nos EUA, WL Moss criou seu trabalho semelhante em 1910.

técnica de agrupamento de sangue

O método de determinação de grupos sanguíneos de acordo com o sistema ABO usando tsoliklonov

O grupo sanguíneo deve ser determinado em ambientes fechados comboa iluminação com uma faixa de temperatura de 15 a 25 graus Celsius, uma vez que desvios dessa norma podem afetar os resultados do estudo. As iniciais e o sobrenome do paciente estão escritos na placa ou placa. Da esquerda para a direita ou ao redor do círculo, a notação padrão para grupos (O (I), A (II), B (III)) é aplicada. Abaixo deles, os soros apropriados são colocados gota a gota por pipetas separadas para cada espécie. Em seguida, o sangue do paciente é adicionado a eles. O material para pesquisa é retirado do lóbulo da orelha ou do dedo. Isso requer a técnica de determinar o grupo sanguíneo de acordo com o sistema ABO.

O uso de eritrócitos,que estão no tubo após o coágulo se formar. É necessário que a quantidade de soro seja superior à quantidade de sangue adicionado em dez vezes. Depois disso, as gotas são misturadas com varas de vidro (separadamente para cada uma). Dentro de cinco minutos, balanceando levemente a placa, observando a aparência de uma reação de hemaglutinação. Encontra-se no fato de que pequenos grumos vermelhos aparecem, mesclando em grandes. O soro neste momento quase completamente perde a cor.

Para eliminar a falsa hemaglutinaçãocolagem simples de eritrócitos, é necessário adicionar uma gota de solução fisiológica após três minutos e verificar se a aglutinação permanece. Se sim, então é verdade. Tudo, a definição de grupos de sangue de acordo com o sistema ABO sobre isso está concluída.

definição de grupos sanguíneos pelo sistema avo

Interpretação de resultados

Como resultado, pode haver quatro reações:

  • não há aglutinação com nenhum dos soros - o primeiro grupo de O (I);
  • a reação se manifestou com os soros I (ab) e III (a) - o segundo grupo A (II);
  • A aglutinação ocorre com os soros I (ab) e II (b) - o terceiro grupo B (III);
  • se a reação ocorrer com três soros,É necessário realizar um procedimento adicional com reagentes do grupo AB (IV), que são padrão; se não houver aglutinação em tal gota, podemos assumir que este é o 4o grupo sanguíneo AB (IV).

Método expresso para o fator Rh

Método para a determinação do sistema ABO grupo sangue envolve a detecção simultânea de Rhesus (Rh).

A superfície da placa é pré-molhada eeles escrevem sobre "soro controle" e "soro anti-resus". Em seguida, uma ou duas gotas dos reagentes necessários são colocadas sob as inscrições e o material analisado é adicionado a elas. Para fazer isso, você também pode usar sangue do dedo (na mesma quantidade que o volume do soro) ou glóbulos vermelhos na parte inferior do tubo após o aparecimento do coágulo (metade do volume de soro). A escolha do material para o resultado final não é afetada. Em seguida, o sangue eo soro são misturados com uma barra de vidro seco, após o que esperam a reacção ocorrer durante cinco minutos. Para eliminar leituras falsas, após três a quatro minutos, é adicionada uma solução isotônica de cloreto de sódio (apenas algumas gotas). A determinação do grupo sanguíneo de acordo com o sistema ABO e Rh é muitas vezes realizada.

algoritmo para determinar o grupo sanguíneo pelo sistema avo

Se a aglutinação de eritrócitos em uma queda comocorre soro, isso indica um sangue positivo de Rhesus. Segundo as estatísticas, Rh + ocorre em 85% da população mundial. A falta disso nos permite falar sobre a afiliação Rh-negativa. Se a aglutinação aparecer no soro de controle, então tornou-se inutilizável. Infelizmente, o algoritmo para determinar o grupo sanguíneo de acordo com o sistema ABO nem sempre funciona perfeitamente.

Que erros podem ser feitos com esta técnica?

Incapazes na determinação do sangue pertencente a um determinado grupo dependem das seguintes razões:

  • Técnico.
  • Especificidade biológica do sangue.
  • A natureza incompleta dos soros e eritrócitos padrão.

Erros técnicos

Possíveis erros na determinação do grupo sanguíneo do sistema ABO de forma cruzada:

  • Sérum incorreto na placa.
  • Proporções quantitativas erradas do material.
  • Uso de placas insuficientemente limpas ouplacas que entram em contato com sangue (cada soro deve ser coletado por uma pipeta separada, que deve ser lavada com uma solução de cloreto de sódio (a uma concentração de 0,9%).
  • Registro incorreto do material analisado.
  • Não observância do tempo necessário parao início da aglutinação - não é necessário se apressar e levar em conta a reação antes do final de cinco minutos, porque o sangue pode ter aglutinogênitos fracos. Exagerar também não é necessário, porque as gotas podem secar das bordas e levar a uma conclusão falsa. É importante seguir as regras para determinar o grupo sanguíneo de acordo com o sistema ABO.
    determinação de grupos sanguíneos pelo sistema avo usando soros padrão
  • A centrifugação errônea também pode levar a um resultado falso.
  • Temperatura do ar excedente admissível,afeta a ausência de aglutinação. Para evitar erros desse tipo, você precisa usar um soro especial, projetado para funcionar em climas quentes. Determine grupos sanguíneos em uma placa ou placa, cuja superfície externa cai em água fria.

Erros de especificidade biológica

Os erros associados à especificidade biológica do sangue analisado são divididos em dois tipos.

  • Dependendo das características dos glóbulos vermelhos.
  • Erros devido às características biológicas do soro.

Consideremos mais detalhadamente cada espécie.

Dependendo das características dos glóbulos vermelhos

  • Aglutinação tardia, devido a "fraco"formas de eritrócitos e antígenos. Para evitar erros, é necessário determinar o grupo sanguíneo de doadores e receptores usando eritrócitos padrão. Identificar o aglutineno A2 deve ser reexaminado com outros tipos de reagentes e outros pratos, aumentando o tempo de gravação da reação.
  • "Panaglutinação" ("autoaglutinação") - habilidadesangue para mostrar a mesma reação de uma natureza não específica com todos os soros, incluindo os próprios. Após cinco minutos, a agudeza de tal aglutinação enfraquece, embora isso se intensifique. Casos similares são observados em pacientes com câncer, queimados, etc. Como controle, é necessário avaliar a manifestação da aglutinação dos eritrócitos analisados ​​no soro padrão do quarto grupo e solução salina. Quando a "panaglutinação", o grupo sanguíneo é determinado como resultado da lavagem tripla de glóbulos vermelhos. Se não der o resultado desejado, vale a pena re-amostragem da amostra de sangue em um tubo pré-aquecido e coloque a amostra em um recipiente térmico para ajudar a manter uma temperatura de 37 graus Celsius e acima. Em seguida, deve ser entregue a um laboratório onde a temperatura acima é mantida e é utilizada salina fisiológica aquecida, placa e reagentes.

regras para determinar o grupo sanguíneo pelo sistema avo

  • Às vezes, os glóbulos vermelhos do sangue sendo analisadossão organizados como "moedas", e podem ser tomados como aglutinados. Se você adicionar duas gotas de solução isotônica e agitar suavemente a placa, os glóbulos vermelhos tomam a posição correta.
  • Aglutinação incompleta ou mista ocorrida em pacientes com segundo, terceiro e quarto grupos como resultado do transplante de medula óssea ou nos primeiros três meses após a transfusão de sangue 0 (I).

Devido às características biológicas do soro

  • Durante o teste de rotina como resultadoa sensibilização anterior revelou anticorpos de especificidade diferente. Precisamos determinar e retirar glóbulos vermelhos sem o conteúdo do antígeno ao qual a imunização é detectada. O destinatário deve necessariamente selecionar o sangue doador compatível individualmente.
  • Não há anticorpos A e B, que são observados em recém-nascidos e pacientes que sofrem de opressão da imunidade humoral.
  • Ao formar "moedas" anómalaso resultado deve ser confirmado tomando os glóbulos vermelhos padrão do primeiro grupo. Uma solução de cloreto de sódio e balanço da placa ajudam a diferenciar os aglutinados reais e "moedas".
    determinação de grupos sanguíneos pelo sistema avo com a ajuda de tsolibones

Erros associados ao uso de eritrócitos padrão inferiores e soros

Os soros fracos com vida útil passada ou com um título inferior a 1:32 podem iniciar a aglutinação fraca e tardia. O uso de tais reagentes é inaceitável.

Uso de glóbulos vermelhos padrão inadequadosou soro de leite, preparado sob condições não estéreis e conservado a um grau insuficiente, leva à aparência de aglutinação "bacteriana", que é de natureza não específica.

Existem muitos pressupostos populares sobregrupos sanguíneos do sistema ABO, que apareceram imediatamente após sua detecção em várias culturas mundiais. Assim, por exemplo, nos anos 30 do século passado no Japão e em alguns outros países, a teoria que ligou o grupo sanguíneo a um ou outro tipo de personalidade ganhou popularidade. As teorias semelhantes são populares hoje em dia.

Há também a opinião de que uma pessoa que tem o grupo A está sujeita a uma ressaca severa, O está associada a dentes bons e ao grupo A2 - com o nível mais alto de QI. Mas tais afirmações não são cientificamente comprovadas.

Examinamos a definição de grupos sanguíneos usando o sistema ABO usando soros padrão.

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